QUANTIFICAÇÃO DE GLICOSE PLASMÁTICA POR FT-IR DO RESPECTIVO SORO UTILIZANDO ANÁLISE DE REGRESSÃO POR MÍNIMOS QUADRADOS PARCIAIS

Resumo

A determinação de glicose possui um valor clínico importante, pois o aumento desta está relacionado à obesidade e a doenças crônico-degenerativas a ela associadas tais como doenças metabólicas, hipertensão, aterosclerose, dislipidemia e Diabetes Mellitus tipo 2. Este conjunto de doenças tem sido denominado Síndrome Metabólica. Nesse contexto, a monitorização regular dos níveis glicêmicos passa a ser um requisito importante para evitar que os pacientes evoluam para essas patologias. Além dos métodos tradicionais de quantificação de glicose (espectrofométrico-enzimático), novas técnicas estão sendo disponibilizadas para os laboratórios de análises clínicas, entre elas a Espectroscopia de Absorção Molecular no Infravermelho com Transformada de Fourier (FT-IR). A FT-IR é classificada como uma metodologia com tecnologia limpa superando, em muitos aspectos, as metodologias clássicas de quantificação de parâmetros bioquímicos, como a redução do volume necessário de sangue coletado, de resíduos gerados, de tempo de análise e de custos, o que seria particularmente importante em pacientes com obesidade e patologias relacionadas. Neste sentindo, o objetivo deste trabalho foi desenvolver e aplicar um modelo para correlacionar a concentração de glicose dosada por Espectroscopia de Absorção Molecular no Visível com a FT-IR, utilizando amostra biológica, para triagem e monitorização terapêutica de trabalhadores da agroindústria do Vale do Rio Pardo com obesidade e patologias relacionadas. A glicose foi dosada em plasma de 118 indivíduos pelo método de referência utilizando kit Glicose PAP Liqueform (ref nº 1001, LabTest). Na sequência, foram adquiridos os espectros de absorbância FT-IR, em quintuplicata, das respectivas amostras de soro pela técnica de reflectância difusa na faixa de 4000 a 600 cm^-1, 4cm^-1 de resolução, 16 scans de varredura. Os espectros foram normalizados, corrigidos para espalhamento de luz (MSC), submetidos aos pré-processamentos centrado na média (CM) e auto escalado (AE) e correlacionados aos valores de glicose plasmática por análise de regressão por mínimos quadrados parciais (PLS) e software Pirouette 4.0 (Infometrix), com validação cruzada de mútua exclusão de um por vez. Os resultados mostraram que foi possível elaborar um modelo PLS-DRIFTS com coeficiente de correlação de validação cruzada (R²) de 0,992 e erro quadrático médio padrão de validação cruzada (RMSECV) de 3mg/dL utilizando 10 fatores e variância relativa acumulada de 51,1%. O modelo melhora a predição quando se passa a trabalhar com 14 fatores. Os resultados permitem concluir que FT-IR se mostra uma metodologia inovadora para quantificação de glicose atendendo as especificações da ANVISA, podendo ser aplicado como método de rotina in house. Na sequência, a investigação se dará através da seleção de faixas espectrais e da validação externa visando a melhorar a qualidade do modelo.