APLICAÇÃO DA FTIR ASSOCIADA A REGRESSÃO LINEAR POR MÍNIMOS QUADRADOS PARCIAIS PARA A QUANTIFICAÇÃO DE HDL-C SÉRICO

Resumo

A determinação da fração HDL do colesterol é um importante fator preditivo clínico de doenças cardiovasculares, visto que age diminuindo o acúmulo de colesterol, removendo seu excesso das paredes arteriais, inibindo a aterogênese. Em indivíduos com sobrepeso e obesidade são encontrados níveis séricos mais baixos de HDL-c, o que pode estar relacionado com a má alimentação e com a falta de exercícios físicos. Logo a monitorização deste parâmetro torna-se necessária para fins de prevenção para patologias desta natureza. Este parâmetro normalmente é quantificado em rotina de laboratórios de análises clínicas utilizando como referência a técnica de Espectroscopia de Absorção Molecar no Visível associado a um ensaio enzimático (reação de Trinder). Esse é um método que gera muitos resíduos, assim novos métodos vêm sendo pesquisados, dentre eles a Espectroscopia no Infravermelho. A Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier (FT-IR), associada a softwares de análise multivariada, tem se tornado uma ferramenta de grande utilidade para fins diagnósticos na área da saúde, visto que é possível obter dados de quantificação simultânea, rápida e de baixo custo, superando em muitos aspectos as metodologias clássicas de quantificação de parâmetros bioquímicos em seres humanos. Com base nessas informações, o objetivo do trabalho foi desenvolver e aplicar um modelo para correlacionar a concentração de HDL-c dosado por espectroscopia de Absorção Molecular no Visível (método colorimétrico) com Espectroscopia de Refletância Difusa no Infravermelho com Transformada de Fourier (DRIFTS), por análise de regressão por mínimos quadrados parciais (PLS), utilizando amostra biológica de soro de 118 indivíduos com obesidade e patologias relacionadas para triagem e acompanhamento terapêutico de trabalhadores da agroindústria do Vale do Rio Pardo. Os espectros foram adquiridos em quintuplicata na faixa de 4.000 a 600 cm^-1, 4 cm^-1 de resolução e 16 scans de varredura. Os espectros médios foram normalizados, corrigidos para espalhamentos de luz, submetidos a pré-processamento centrado na média (CM) ou auto escalado (AE) e validados por validação cruzada com mútua exclusão de um por vez, buscando valores de coeficiente de regressão (R²) maior que 0,99, utilizando-se o software Piroutte 4.0 (Infometrix). Os resultados indicaram que foi possível elaborar um modelo PLS-DRIFTS de HDL-c dosado pelo método de referência, onde obteve-se coeficiente de correlação de 0,990, erro quadrático médio padrão de validação cruzada (RMSECV) de 1,5 mg/dL, com total de 11 fatores e variância relativa acumulada (VRA) de 51,4%. Pode-se concluir que a FTIR é uma metodologia inovadora adequada para dosar HDL-c em soro de pacientes, que atende as especificações da ANVISA, podendo ser aplicado como método de rotina in house. Na sequência, a investigação se dará através da seleção de faixas espectrais e da validação externa visando melhorar a qualidade do modelo.