Introdução: As infecções nosocomiais causadas por bacilos gram-negativos multirresistentes tornaram-se um problema significativo nos últimos anos, aumentando assim o consumo de carbapenens. A resistência aos carbapenens é principalmente devido à produção de carbapenemases, que são240beta-lactamases e240não existe nenhum método padronizado para a detecção destas.240240O método de primeira escolha, no qual se obtêm resultados satisfatórios é o de240 reação em cadeia da polimerase (PCR). Objetivo: Identificar fenotipicamente e genotipicamente a produção de metalo-beta-lactamase (MBL) e pesquisar a presença do gene codificador bla_NDM-1 bla_IMP-1,bla_SPM-1 e bla_VIM-1240 em cepas de bacilos gram-negativos, através da técnica de PCR. Materiais e métodos: Foram avaliados 25 isolados de pacientes atendidos em um Hospital Escola do Vale do Rio Pardo e Taquari entre maio de 2013240e maio de 2014. A identificação bioquímica foi realizada segundo protocolo da ANVISA e o antibiograma pelo método de ágar difusão em disco. A triagem fenotípica foi feita pelo teste modificado de aproximação de discos, utilizando o EDTA como inibidor e a presença dos genes através da técnica de reação em cadeia da polimerase. Resultados: Os isolados avaliados apresentaram diferentes perfis de resistência aos carbapenens diante do teste fenotípico realizado com adição de EDTA 0,1M (Halos â211¥5 mm). Do total de 25 cepas de bacilos gram-negativos, 100% mostrou ser resistentes às cefalosporinas de 3ª geração, 13 (52%) a pelo menos um dos carbapenêmicos estudados e 9 (36%) mostrou-se resistente aos 3 carbapenêmicos. Somente 3 (12%) dos isolados mostrou-se produtores de metalo-beta-lactamase pelo teste fenotípico com o acréscimo de EDTA. Através da técnica de reação em cadeia da polimerase foi possível identificar a presença de 3 dos 4 genes propostos no estudo sendo eles bla_NMD-1 bla_IMP-1 e bla_SPM-1. No resultado do teste genotípico na análise da presença de MBL, utilizando o gene codificador bla_NDM-1,, pode-se identificar positividade em 4 isolados. Utilizando o gene codificador bla_IMP-1 identificou-se a presença do mesmo em 3 isolados, já utilizando o gene codificador bla_SPM-1 encontrou-se positividade somente em 1 isolado. O gene bla_VIM-1 não foi encontrado em nenhum dos isolados. Conclusão: A racionalização na utilização de antimicrobianos requer mais atenção, devido à vasta progressão de bactérias multirresistentes, tornando as opções terapêuticas ainda menores. O presente estudo forneceu resultados positivos em relação à presença de MBL e também aos genes codificadores bla_NDM-1, bla_IMP-1 e bla_SPM-1240em amostras de bacilos gram-negativos oriundas de um Hospital Escola do Vale do Rio Pardo e Taquari. A identificação de mecanismos de resistência ainda é um grande desafio, mas, em geral, pode-se observar que a análise fenotípica foi menos confiável do que a caracterização genotípica. Constatou-se que ensaios moleculares são mais recomendados devido a sua rapidez e sensibilidade na caracterização dos isolados bacterianos.

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