SISTEMA PARA AUTOMAÇÃO DO PROCESSO DE COLETAS DE INFORMAÇÕES DO ENSAIO COMETA EM ANÁLISES TOXICOLÓGICAS

Alexandre Rieger, Gabriel Edson Werner Bittencourt, Rolf Fredi Molz

Resumo


A genotoxicidade é a capacidade que algumas substâncias têm de induzir alterações no material genético de organismos a elas expostos. Efeito este responsável pelo surgimento de cânceres e doenças hereditárias nas células. Existem, no entanto, algumas técnicas para se avaliar estes efeitos genotóxicos, como o teste de Ammes, Ensaio Cometa e o teste de micronúcleo. Dentre estas, o Ensaio Cometa tornou-se uma das mais utilizadas, principalmente devido ao seu baixo custo, versatilidade e fácil execução, sendo assim amplamente utilizada em Genética Toxicológica, estudos de apoptose, estudos de nutrição, danos e reparo no DNA. Existem duas versões compatíveis ao Ensaio Cometa. A primeira, chamada de neutra, é considerada menos sensível, pois detecta apenas lesões de fita dupla do DNA. Já a segunda, denominada alcalina, possibilita detecções mais variadas, como quebra de fita simples, lesões de sítios alcalinos lábeis e locais de reparo incompletos. Por sua maior precisão nos resultados, esta segunda versão é utilizada na maioria dos laboratórios. Entretanto, a classificação das amostras obtidas através do Ensaio Cometa pode ser prejudicada pela subjetividade do analisador ao realizar o experimento pelo modo visual. Um sistema de análise e processamento de imagem, no entanto, pode ser o suficiente para minimizar este prejuízo e proporcionar mais confiança no ensaio. O processamento de uma imagem consiste em transformá-la sucessivamente com o objetivo de extrair mais facilmente a informação nela presente. A noção de imagem pode ser definida como uma função bidimensional, na qual a intensidade de luz, coordenadas espaciais definidas por f(x,y), é proporcional ao nível de cinza naquele ponto. Imagens digitais são representadas por uma matriz, cujas colunas e linhas identificam um determinado ponto, nomeado de pixel, no qual o valor correspondente identifica o nível de cinza na especificada coordenada. O processamento de imagens é disposto no trabalho pelas etapas de: aquisição de imagens, pré-processamento, segmentação, representação e descrição, base de conhecimento e reconhecimento e interpretação. O objetivo principal deste trabalho é desenvolver um software para automação dos cálculos do tamanho da cabeça da célula, comprimento da cauda, o comprimento total da célula e o comprimento do momento da cauda através de imagens obtidas em microscópio do Ensaio Cometa no laboratório de biologia da UNISC. O algoritmo será baseado nas etapas de processamento de imagem desenvolvidas pela autora Brianezi (2008) no software ImageJ, e também serão adicionadas outras técnicas de processamento, entre elas a Transformada de Hough e o Gaussian Blur, de acordo com a necessidade do autor para gerar a automação do processo. O algoritmo em seu final gerará uma planilha com as informações coletadas, garantindo a organização dos dados.


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