EFEITO DO TRATAMENTO COM VITAMINA C EM RATOS WISTAR HIPERGLICÊMICOS: UMA ANÁLISE ELEMENTAR E METABÓLICA
Resumo
Diabetes mellitus (DM) é uma desordem metabólica caracterizada pelo estado hiperglicêmico crônico decorrente da deficiência ou resistência à ação do hormônio insulina. A vitamina C é um importante antioxidante que tem sido associado à redução da resistência à insulina em portadores de DM. A técnica de Particle-Induced X-ray Emission (PIXE) possui capacidade multi-elementar, capaz de quantificar as concentrações de elementos em amostras biológicas. A análise metabolômica por Espectroscopia de Reflectância Difusa no Infravermelho com Transformada de Fourier (FT-IR) tem sido utilizada para avaliar componentes bioquímicos oriundos de fluidos biológicos. O objetivo deste estudo foi analisar as concentrações de minerais e alterações metabólicas em240ratos Wistar240hiperglicêmicos tratados com vitamina C. Foram utilizados 24 animais, divididos em 4 grupos: Controle (C), Sacarose (S), Vitamina C (VitC) e Vitamina C+Sacarose (VitC+S). Durante 8 meses, os ratos foram tratados com doses de sacarose (240 g/L) e vitamina C (0,5 g/L), sendo oferecidos na água de beber. Tanto os líquidos, quanto o alimento, foram oferecidos ad libitum. Foram considerados diabéticos os ratos que apresentassem glicose superior a 150 mg/dL, segundo Animal Models of Diabetic Complications Consortium. Ao final do experimento, o sangue total obtido durante o sacrifício foi congelado para posterior processamento. O nível elementar no sangue liofilizado foi mensurado no Laboratório de Implantação Iônica do Instituto de Física da UFRGS, através da técnica de PIXE. Uma análise metabolômica foi obtida pela utilização de FT-IR, em que amostras com 5 µL do sangue coletado durante o sacrifício foram misturadas com 100 mg de KBr e liofilizadas por 2h15min para serem analisadas por Transformada de Fourier (DRIFTS) na faixa de 4000 a 600 cm-1, com 16 scans de varredura e 4 cm-1 de resolução e normalização em relação à banda I, e os espectros médios calculados. Os espectros médios foram transformados por normalização (0-100), correção para múltiplo espalhamento de luz (MSC), pré-processados por autoescalamento e centragem na média e avaliados por Modelagem Independente Flexível por Analogia de Classes (SIMCA). Foi possível observar a influência do consumo crônico de sacarose sobre a glicemia dos ratos, contudo não a ponto de torná-los diabéticos (p=0,001). A vitamina C foi determinante na redução da glicemia (p=0,001). Na análise elementar, verificaram-se diferenças significativas entre os grupos em relação aos minerais cálcio (p=0,032), cloro (p=0,012), cromo (p=0,045) e sódio (p=0,010). A análise por componentes principais (PCA) indicou que o grupo S apresentou a maior distância em relação aos demais grupos com alterações espectrais evidentes na região de absorção de proteínas e carboidratos, porém mais evidentes em relação aos lipídios. A introdução de vitamina C (grupo vitC+S) recuperou o padrão espectral em relação ao grupo controle. A análise via algoritmo SIMCA, considerando grupo S como classe I e os demais grupos como classe II, permite identificar grupos de ratos expostos à sacarose dos demais grupos. Os resultados sugerem que as adaptações metabólicas sanguíneas em modelos de roedores podem ser acompanhadas pelas técnicas de PIXE e FT-IR associada à análise multivariada. Os estudos prosseguem visando a encontrar associações via mínimos quadrados parciais (PLS) entre os valores de minerais e os respectivos espectros de sangue total.
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