QUANTIFICAÇÃO DE ÁCIDO ÚRICO EM SANGUE TOTAL POR ESPECTROSCOPIA DE REFLETÂNCIA DIFUSA NO INFRAVERMELHO: UM ESTUDO COM PRODUTORES RURAIS E TRABALHADORES DA AGROINDÚSTRIA
Resumo
As doenças renais, segundo a literatura, estão se tornando cada vez mais um problema de saúde pública no Brasil e no mundo. Fatores como a obesidade e tabagismo aumentam essa probabilidade e culminam em necessidade de tratamento para essas patologias.O excesso de ácido úrico no organismo caracteriza uma situação clínica conhecida como hiperuricemia e é responsável pela precipitação de cristais de ácido úrico nas articulações, parênquima renal e túbulos renais. Esta condição clínica é conhecida como gota e pode ser desencadeada por um metabolismo formador de ácido úrico acelerado ou por uma excreção deficiente deste ácido pelos rins. A análise de espectroscopia no infravermelho com Transformada de Fourier (FT-IR), combinada com a análise quimiométrica, vem se destacando nos últimos anos como uma técnica aplicada à área das ciências ômicas na saúde humana. O infravermelho realiza uma leitura completa do que se apresenta na amostra, então, pode ser associada com um marcador ou seu estado metabolômico. Como vantagens da utilização desta técnica, tem-se o tempo de análise reduzido, a preservação da amostra e a geração mínima de resíduo. Tem sido demostrada a utilização de FT-IR para a determinação de glicose, proteínas totais, uréia, triacilgliceróis, colesterol, entre outros paramentros bioquímicos. O método tradicional de dosar e quantificar ácido úrico é dado pela reação de Trinder, o que desprende tempo e volume de amostra, sendo que este é realizado com soro ou plasma. A FT-IR é classificada como uma metodologia com tecnologia limpa superando em muitos aspectos as metodologias clássicas de quantificação de parâmetros bioquímicos, como a redução do volume necessário de sangue coletado, de resíduos gerados, permite uma rápida análise e de custos. Neste contexto, pretende-se, com este trabalho, validar uma metodologia de análise por FT-IR, utilizando amostra biológica para triagem e monitorização terapêutica de produtores rurais e trabalhadores da agroindústria do Vale do Rio Pardo. Primeiramente, o ácido úrico foi quantificado em soro de 78 indivíduos pelo método de referência, manualmente em triplicata. Como método inovador foram adquiridos os espectros de absorbância FT-IR, em quintuplicata, das respectivas amostras de sangue total pela técnica de reflectância difusa na faixa de 4000 a 600 cm-1, 4 cm-1 de resolução, 16 scans de varredura. Os espectros foram normalizados, corrigidos para espalhamento de luz (MSC), submetidos ao pré-processamento centrado na média (CM) e correlacionando aos valores de ácido úrico de sangue total por análise de regressão por mínimos quadrados parciais (PLS) em software Pirouette 4.0 (Infometrix), com validação cruzada. Os resultados mostraram que foi possível elaborar um modelo PLS-DRIFTS na faixa de 4000-2401, 2300-600 cm-1 com coeficiente de correlação de validação cruzada (R2) de 0,9997 e erro quadrático médio padrão de validação cruzada (RMSECV) de 0,7949 mg/dL utilizando 6 variáveis latentes. Os resultados permitem concluir que FT-IR se mostra uma metodologia inovadora para quantificação de ácido úrico, atendendo às especificações da ANVISA, podendo ser aplicado como método de rotina. Na sequência, a pesquisa se dará através da seleção de faixas espectrais, definição de grupos variáveis de pessoas e da validação externa visando a melhorar a qualidade do modelo.
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