DETERMINAÇÃO DE HEMATÓCRITO E HEMOGLOBINA EM ESCOLARES POR ESPECTROSCOPIA DE REFLECTÂNCIA ESPECULAR NO INFRAVERMELHO.
Resumo
A FT-IR (Espectroscopia de Absorção Molecular Reflectância Especular no Infravermelho) é uma metodologia de grande interesse, pois vem se tornando cada vez mais uma técnica analítica de possível introdução em laboratórios de análises clínicas. Por ser caracterizada como um método de fácil manuseio, é uma importante ferramenta aplicável a rotinas laboratoriais. A FT-IR Especular é uma técnica de suma importância devido a mesma não requerer gastos com reagentes auxiliares nas análises, traduzir a agilidade no fluxo de trabalho, baixo custo, rapidez na análise, poucas/nenhuma necessidade de pré-processamento com a amostra, baixo impacto ambiental, apresentar flexibilidade nas adaptações de métodos analíticos e com elevado poder preditivo (acurácia). O objetivo deste estudo é validar um método simultâneo para análise de hematócrito e hemoglobina em escolares por Espectroscopia de Absorção Molecular Reflectância Especular no Infravermelho, tornando-o um método de rotina. Foi realizado um estudo transversal em que foram incluídos 100 escolares de Santa Cruz do Sul de ambos os sexos, com idade entre 7 e 17 anos, foi realizado o hemograma completo (hematócrito, hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), distribuição do diâmetro das células vermelhas (red cell distribution width - RDW) pelo equipamento automático da marca Sysmex, modelo XS800i e, em seguida, realizadas triplicatas em probes de aço inox e analisadas por espectroscopia FT-IR por reflectância especular com 8 pulsos de varredura, 4 cm-1 de resolução e na faixa de 4000-450 cm-1 em espectrômetro Spectrum 400 FT-IR/FT-NIR Spectrometer (Perkin Elmer®) com laser de HeNe de 633nm e acessório de reflectância especular (Pike Technologies, Madison, USA). Os espectros adquiridos foram submetidos à autocorreção de linha de base, convertidos em extensão *.csv, organizados em planilha Excel, normalizados (0-1) e calculado o espectro médio de cada amostra. Em seguida, o conjunto de espectros médios foi submetido à análise quantitativa univariada pelo método de Regressão Linear Simples (SLR) entre as intensidades das absorbâncias e os respectivos valores de hematócrito e hemoglobina. Utilizando como critério estatístico de correlação o coeficiente de determinação (R2) e o erro de previsão (s) e os parâmetros HCA (agrupamento hierárquico) e PLS (Análises de Regressão por Mínimos Quadrados Parciais). Quando realizados testes para hemoglobina encontraram-se os seguintes resultados para o parâmetro PLS: coeficiente de determinação de 0,98 e erro médio quadrático RMSECV de 0,16 mg dL -1, já para o hematócrito, encontrou-se um coeficiente de determinação de 0,94 e um erro médio quadrático de 0,99 mg dL -1. Quando realizamos os testes com o parâmetro HCA, não encontramos resultados significativos separando corretamente a amostra em grupos. Concluímos que o algoritmo PLS-DRIFTS apresentou-se aplicável para análises de hemoglobina e hematócrito, tornando-o um método robusto, sem uso de reagentes, não gerando resíduos e com maior acurácia, já o método de HCA não mostrou-se significativo para determinar níveis de hemoglobina e hematócrito.
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