PROSPECÇÃO DE ESPÉCIES BACTERIANAS PRODUTORAS DE ENZIMA EM MEIO ALTERNATIVO PÓ DE FUMO

Resumo

Em virtude das quantidades e de certas características das substâncias poluidoras, como persistência e toxicidade, a poluição ambiental representa um perigo para a saúde humana, de animais e de plantas, além de comprometer a habilidade ambiental para sustentação da vida. Deste modo, reduzir e/ou remediar estes poluentes é extremamente necessário à melhoria da qualidade ambiental. O objetivo desse trabalho é a prospecção de microrganismos produtores de enzimas, cultivados em meio contendo o resíduo industrial pó de fumo, como alternativa em etapas de tratamento de efluentes da indústria fumageira. Para isso, a triagem de bactérias presentes no resíduo foi realizada pela técnica de diluição seriada e semeadura em Ágar Nutriente. Após incubação a 30ºC por 72 h as bactérias foram isoladas de acordo com as características macroscópicas das distintas colônias e pré-identificadas pela forma, arranjo e reação tintorial das células. Para verificação do potencial enzimático, os isolados foram repicados para meios de cultura específicos (celulase, protease, amilase e pectinase) e incubados a 30ºC. As bactérias foram avaliadas pela sua capacidade de hidrólise dos respectivos substratos através do índice enzimático (IE). O resíduo pó de fumo foi encaminhado à Central Analítica da UNISC e caracterizado conforme a presença de metais, além do teor de cinzas. Análises complementares de nitrogênio (método Kjeldahl), fósforo (colorimetria) e verificação de princípios ativos de agrotóxicos por meio da Cromatografia Gasosa com detector de Espectrometria de Massas (CG-EM) serão realizadas na sequência do estudo. O isolado com maior IE foi submetido à identificação por provas metabólicas. Foram isoladas do resíduo pó de fumo 6 diferentes colônias bacterianas, submetidas a coloração de gram. Após os testes enzimáticos, foi selecionado o isolado que apresentou maior e mais ampla atividade enzimática, sendo IEpectinase= 3,492±0,449; IEcelulase=5,472±0,488; IEamilase=1,350±0,076; IEprotease= 1,661±0,239. O isolado, nomeado como PF1, apresentou resultados positivos para a fermentação de carboidratos (glicose, lactose e dulcitol) sem a formação de gás, hidrólise da gelatina, e resultados negativos para a hidrólise de ureia, e crescimento em ágar cetrimina, VP (Voges Proskauer) e VM (vermelho de metila), citrato, lisina descarboxilase e fenilalanina desaminase. O resíduo apresentou 40,31±1,59 % de cinzas, destacando-se na análise de metais os teores médios de Ca (296,43 mg mL^-1), K (305,70 mg mL^-1), Al (94,69 mg mL^-1) e Mg (71,17mg mL^-1). As concentrações de metais presentes diferem das concentrações encontradas em outros trabalhos, devido a sua natureza mista. O pó de fumo pode conter resíduos em proporções distintas de talo e folha, que poderiam contribuir para essa diferenciação. O isolado testado mostrou, até o momento, excelente potencial para a bioconversão do resíduo em enzimas com aplicação industrial, demonstrando através da curva de crescimento a adaptação de PF1 ao pó de fumo como substrato alternativo para crescimento.